纯化L-门冬酰胺酶的方法

摘要

本发明公开了一种纯化L-门冬酰胺酶的方法，生产L-门冬酰胺酶的菌株经过常规处理并经过离子交换层析后，进行疏水层析操作，疏水层析操作包括如下步骤：①向经过离子交换柱层析的L-门冬酰胺酶洗脱液中加入盐并搅拌，得疏水层析上样液；②将步骤①所述的上样液流经被平衡液平衡好的疏水层析柱内，并收集上样流出液；③用洗涤液洗涤疏水层析住，并收集洗涤流出液；④将步骤②得到的上样流出液和步骤③得到的洗涤流出液合并，得到疏水层析流出液；随后对该流出液进行浓缩、除菌、干燥，制得L-门冬酰胺酶。本发明的方法在一定程度提高L-门冬酰胺酶活性的同时，可有效吸附细菌内毒素，经过疏水层析后，内毒素的含量小于0.25EU/U。

主权项

一种纯化L-门冬酰胺酶的方法，其特征在于：生产L-门冬酰胺酶的菌株经过常规处理并经过离子交换层析后，进行疏水层析操作，得到疏水层析流出液，随后对该流出液进行浓缩、除菌、干燥，制得L-门冬酰胺酶；所述疏水层析操作包括如下步骤：①向经过离子交换柱层析的L-门冬酰胺酶洗脱液中加入盐并搅拌，得疏水层析上样液；②将步骤①所述的上样液流经被平衡液平衡好的疏水层析柱内，并收集上样流出液；③用洗涤液洗涤疏水层析柱，并收集洗涤流出液；④将步骤②得到的上样流出液和步骤③得到的洗涤流出液合并，得到疏水层析流出液；步骤②中所述的平衡液和步骤③中所述的洗涤液为相同的盐溶液，该盐溶液中的溶质与步骤①中所述的盐相同均为Na2SO4；该盐溶液的盐浓度与步骤①中所述的上样液的盐浓度相同，均为4％至8％。