微生物发酵液中乙醇含量的快速检测方法及试剂盒

摘要

本发明公开了属于化学成分定量检测技术范围的一种乙醇及还原糖含量的快速检测方法，其步骤包括对微生物发酵液进行预处理，用DNS建立还原糖标准曲线并检测样品中的还原糖含量，用重铬酸钾建立还原糖标准曲线并检测样品，用重铬酸钾建立乙醇标准曲线并计算样品中乙醇含量，本发明不需要精密的检测仪器，就能直接从微生物发酵液中检测乙醇的含量，具有精确度高、操作快速简便、需用的样品量及试剂量少、成本低、需用的仪器设备少、对环境的要求低，检测过程不产生污染，一次检测的样品数多等优点。

主权项

微生物发酵液中乙醇含量的快速检测方法及试剂盒，其特征在于：所述的检测方法为：(1)对微生物发酵液进行预处理：离心去除发酵液中的不溶性物质，然后用三氯乙酸去除发酵液中的蛋白质，再利用十六烷基三甲基溴化胺去除发酵液中的多糖，如此处理后的样品中所含有的主要成分为乙醇和少量还原糖。(2)用3，5-二硝基水杨酸建立还原糖标准曲线并检测样品中的还原糖含量：3，5-二硝基水杨酸和还原糖的颜色反应可以通过读测A550光吸收检验，根据还原糖在3，5-二硝基水杨酸处理下的标准曲线将样品中的还原糖准确定量。(3)用重铬酸钾建立还原糖标准曲线并检测样品：利用样品中还原糖含量，根据重铬酸钾还原糖标准曲线，计算出样品中还原糖在重铬酸钾总氧化反应信号中所占的部分。(4)用重铬酸钾建立乙醇标准曲线并计算样品中乙醇含量：从重铬酸钾总氧化反应信号中减去还原糖与重铬酸钾反应所占的部分，得出重铬酸钾与样品中乙醇反应的信号强度，根据乙醇与重铬酸钾反应的标准曲线，计算出样品中乙醇的浓度。本发明专利试剂盒试剂包括样品预处理所需试剂、还原糖检测反应试剂、重铬酸钾氧化反应试剂、还原糖标准品、乙醇标准品、反应终止液、微孔板。