发明名称 |
禽流感病毒原位PCR检测探针及其制备方法 |
摘要 |
本发明公开了一种特异性好、敏感性高的禽流感病毒原位PCR检测探针及其制备方法。该方法从GeneBank下载禽流感病毒NP基因序列,通过比对选取NP基因中较为保守的片断,设计一对引物,通过RT-PCR方法扩增270bp的目的片段,并分子克隆构建重组质粒测序,测序后证实本研究设计的引物扩增序列与AIV各亚型NP基因具有较高同源性,可达92%以上,利用地高辛标记扩增产物制备探针。该探针用于间接原位RT-PCR检测方法对细胞内的禽流感病毒进行检测和定位,可特异性的检测禽流感病毒,而新城疫、传染性法氏囊等病毒检测为阴性,具有良好的特异性,探针可以检测到约1pg/uL的质粒DNA,具有高敏感性。 |
申请公布号 |
CN101818208A |
申请公布日期 |
2010.09.01 |
申请号 |
CN200910214054.7 |
申请日期 |
2009.12.22 |
申请人 |
中华人民共和国珠海出入境检验检疫局 |
发明人 |
杨素;陈博文;沙才华;廖明;徐海聂;廖秀云 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12P19/34(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
广州市红荔专利代理有限公司 44214 |
代理人 |
王贤义 |
主权项 |
一种禽流感病毒原位PCR检测探针,其特征在于,运用RT-PCR法制备所述检测探针的特异性引物序列为SEQ1,SEQ2:SEQ1:5’-AAGCGGAGGAAACACCAAC-3’;SEQ2:5’-ATGTCAAAGGAAGGCACGAT-3’。 |
地址 |
519015 广东省珠海市九州大道东1144号 |