迷迭香酸在大肠杆菌L-天冬酰胺酶激活剂中的应用

摘要

本发明涉及迷迭香酸在大肠杆菌L-天冬酰胺酶激活剂中的应用，属于生物医药领域。首先从大肠杆菌中制备L-天冬酰胺酶提取液，然后在L-天冬酰胺酶活性测定体系中分别加入不同浓度的迷迭香酸和L-天冬酰胺，测定每个反应体系的反应速度，计算每个迷迭香酸浓度下的米氏常数，判断其对L-天冬酰胺酶的激活作用。迷迭香酸在浓度为0.375×10-4～3.0×10-4g/ml范围内能显著提高L-天冬酰胺酶催化L-天冬酰胺的降解活性。本发明可以降低临床上在肿瘤治疗过程中的L-天冬酰胺酶的用量，降低因其免疫原性而带来的副作用，或者据此设计针对细菌L-天冬酰胺酶的靶位点的迷迭香酸衍生物作为新的抗菌药物。

主权项

迷迭香酸作为大肠杆菌L-天冬酰胺酶激活剂的应用，其特征在于首先从大肠杆菌制备L-天冬酰胺酶提取液；在L-天冬酰胺酶活性测定体系中分别加入TE缓冲液以及不同浓度的迷迭香酸和L-天冬酰胺，45℃水浴加热，用20％三氯乙酸终止反应；反应体系离心后加AB-8大孔树脂悬浮液，充分振荡后离心以去除溶液中的迷迭香酸，分别取上清于蒸馏水中，加Nessler试剂，振荡使之充分混匀后于395nm处测定吸光度，测定酶促反应速度；计算每个迷迭香酸浓度下的米氏常数，迷迭香酸浓度为0.375×10-4～3.0×10-4g/ml时可显著提高体系中L-天冬酰胺酶活性，降低大肠杆菌L-天冬酰胺酶催化L-天冬酰胺分解反应的米氏常数值，提高反应速度。