一种钙质沉积物有机磷的提取及组成分析方法

摘要

一种钙质沉积物有机磷提取及组成分析方法，其特征是先采用偏酸性的乙二胺四乙酸溶液对沉积物进行冲洗并离心，再结合传统提取方法NaOH加乙二胺四乙酸混合溶液(NaOH+EDTA)对沉积物进行振荡提取并离心，然后取部分NaOH+EDTA提取液用光谱仪测定总磷，将剩余提取液进行浓缩，最后用31P核磁共振技术(31P-NMR)分析提取液中有机磷的组成。

主权项

一种钙质沉积物有机磷提取及组成分析方法，其特征是先采用偏酸性的乙二胺四乙酸溶液对沉积物进行冲洗并离心，然后用NaOH与乙二胺四乙酸的混合溶液NaOH+EDTA作为提取剂提取沉积物有机磷，用光谱仪测定NaOH+EDTA提取液中的总磷；将提取液进行浓缩后，用31P核磁共振技术31P-NMR分析提取液中各类型磷化合物的组成比例，通过计算进一步得到沉积物中有机磷的组成含量信息；具体步骤如下：(1)沉积物样品准备：采集新鲜沉积物，先在超低温冰箱冷冻不少于4h，然后真空干燥，最后样品经过研磨、过筛，室温密封保存；(2)冲洗：将沉积物样品与偏酸性的乙二胺四乙酸溶液在离心管中混合振荡，然后离心去掉上层溶液；(3)有机磷提取：向离心管继续加入NaOH+EDTA提取剂，接着振荡、离心，取一小部分上层溶液用仪器测定总磷；(4)浓缩：将剩余提取液倒入旋转瓶，经真空旋转蒸发浓缩，最后将浓缩液冷冻保存；(5)31P-NMR分析样品准备：取出呈冰冻状态的浓缩样品，在室温下回温至液态，离心去除沉淀，向溶液中加入重水后，进行31P-NMR分析；(6)31P-NMR分析：核磁共振仪为BRUKER AV400，31P-NMR分析在161.98MHz下进行，采用BRUKER标准腔BBO探头，环境温度20℃左右，单个样品扫描次数在17000～26000之间，分析时间在12h至18h之间，31P化学位移以85％H3PO4为基准，组成鉴别参考磷标样的化学位移，分别为膦酸20ppm、芳香族二酯7.4ppm、正磷酸6～7ppm、正磷酸单酯4～6ppm、磷脂1～3ppm、DNA 0ppm、焦磷酸-3.5～-4.5ppm、多聚磷末端磷-3～-4ppm和多聚磷中间磷-17～-19ppm；(7)计算：通过面积积分得到31P-NMR波谱中各类型磷化合物的组成比例，根据提取液的总磷浓度计算得到各类型磷化合物的浓度，根据沉积物重量计算得到单位重量沉积物中有机磷的组成含量；上述方法中的钙质沉积物金属元素应满足钙与铁和铝含量之比大于0.7，即Ca/(Fe+Al)＞0.7。