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Proceso para preparar un compuesto de insulina donde a) en una mezcla reactiva conteniendo al menos aproximadamente un 55%, preferiblemente al menos aproximadamente un 60%, más preferido al menos un 70%, de agua (peso/peso), un precursor de insulina está sujeto a una escisión enzimática y, después de eso, b) el producto intermedio se acopla con un compuesto nucleófilo en la mezcla reactiva usada para la reacción de escisión enzimática con la condición de que la composición de la mezcla reactiva ha sido modificada de modo que el contenido de agua en la mezcla reactiva está en el rango de aproximadamente un 10% a aproximadamente un 50% de agua (peso/peso), preferiblemente en el rango de aproximadamente un 20% a aproximadamente un 40% de agua (peso/peso), y c), si se desea, eliminando el/los grupo(s) de protección, y donde ningún aislamiento del producto intermedio se realiza entre la fase de escisión (a) y la fase de acoplamiento (b).
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