用高效液相色谱测定水蕨DNA甲基化含量的方法

摘要

用高效液相色谱测定水蕨DNA甲基化含量的方法，其步骤包括：采集待测的水蕨样品并提取样品中的DNA，得到待测DNA样品，溶解于缓冲液后于-20℃保存备用；将待测DNA样品水解并离心，取上层清液，得到待测样品溶液；配制胞嘧啶标准样品和5-甲基胞嘧啶标准样品的混合标准样品溶液，在相同的高效液相色谱测定条件下，通过混合标准样品溶液和待测样品溶液的峰的保留时间和峰面积来确定待测DNA样品中的DNA甲基化含量。本发明利用高效液相色谱来进行水蕨的DNA甲基化含量的测定，不仅方法简便，成本较低，并且测定快速准确，定量分析效果较好。同时，由于高效液相色谱技术本身已经应用非常广泛，技术相对成熟，并且水蕨中提取DNA也为常规方法可以达到，因此可以推广应用。

主权项

用高效液相色谱测定水蕨DNA甲基化含量的方法，其步骤包括：1)采集待测的水蕨样品并提取样品中的DNA，得到待测DNA样品，溶解于缓冲液后于-20℃保存备用；2)将待测DNA样品水解并离心，取上层清液，得到待测样品溶液；3)配制胞嘧啶标准样品和5-甲基胞嘧啶标准样品的混合标准样品溶液，在相同的高效液相色谱测定条件下，通过混合标准样品溶液和待测样品溶液的峰的保留时间和峰面积来确定待测DNA样品中的DNA甲基化含量；所述高效液相色谱的流动相为质量分数为5％的甲醇溶液，质量分数为0.2％的三乙醇溶液和质量分数为94.8％且摩尔浓度为5mmol/L的戊烷磺酸钠混合组成，并且用磷酸调节混合溶液pH值到4的混合溶液。