一种从转基因牛乳中纯化重组人乳铁蛋白的方法

摘要

本发明提供了一种从转基因牛乳中纯化重组人乳铁蛋白的方法，该方法首先制得去除乳脂和酪蛋白的乳清，然后用阳离子交换色谱进行纯化，并用0.4-1M NaCl、20mM Na3PO4梯度洗脱，最后对洗脱液进行超滤或透析处理得到高纯度的重组人乳铁蛋白。采用本发明所述方法得到的重组人乳铁蛋白纯度高达95％以上，具有和天然人乳铁蛋白相似的抵抗胰蛋白酶消化和结合铁离子的能力，而且纯化成本低，适合工业化规模生产。

主权项

一种从转基因牛乳中纯化重组人乳铁蛋白的方法，其特征在于它包括如下步骤：(1)制备乳清：将转基因牛乳在4℃下以转数4500rpm离心15min去除乳脂，然后将乳样pH值调至3.8-4.6，脱脂乳与1M HCl的体积比为25∶1；待酪蛋白沉淀后再将pH值调至7.5，乳清与1MNaOH的体积比为25∶1，这样去除酪蛋白，得到备用乳清；(2)用偶联了磺酸基的琼脂糖凝胶阳离子交换色谱进行纯化，并用0.4-1M NaCl、20mM Na3PO4梯度洗脱，收集合并同一峰值的洗脱液；(3)对洗脱液进行超滤或透析处理，制得高纯度的重组人乳铁蛋白。