红曲协同发酵提高蛹虫草子实体和虫草菌素产量的方法

摘要

本发明公开了红曲协同发酵提高蛹虫草子实体和虫草素产量的方法，事前，需要进行菌种活化和拮抗试验，嗣后需要进行虫草菌素的检测；该方法包括4个阶段：(1)红曲培养；(2)蛹虫草培养；(3)双菌混合协同发酵；(4)子实体管理。本方法不仅能明显提高蛹虫草子实体产量，提高达30％多；而且还能提高蛹虫草子实体的质量，使子实体里虫草菌素含量提高20％，达到20.2mg/g以上。这对提高蛹虫草固体发酵的产量和效率，以及提高药物蛹虫草菌粉和胶囊中有效成分的含量具有重要意义，具有良好的应用开发前景。

主权项

红曲协同发酵提高蛹虫草子实体和虫草素产量的方法，其特征在于该方法包括：(1)红曲培养：在容积为300ml的圆柱形无色玻璃瓶中装入25g大米，按1∶1.6的料水比加入40ml蒸馏水；用耐高温单层聚丙烯塑料膜封口，121℃、30min高压灭菌，冷却后接种已活化好的红曲菌种，置30℃下黑暗恒温培养；(2)蛹虫草培养：罐头瓶中装入25g大米，麦麸1.2g，玉米粉0.4g，豆粉0.4g，按1∶1.6的料水比加入43.2ml营养液；用耐高温单层聚丙烯塑料膜封口，121℃下高压灭菌30min，冷却后，接种蛹虫草菌株的孢子悬液，置26℃下黑暗恒温培养；所述营养液配方为葡萄糖10g，蛋白胨5g，MgSO4·7H2O 1g，KH2PO4 2g，柠檬酸铵1g，水1000ml；(3)双菌混合：待培养的红曲和蛹虫草都封底后，在无菌条件下将红曲与蛹虫草的大米培养物按1∶9的比例混合，混合后搅拌均匀，置于26℃下黑暗恒温培养，5～7d后进入蛹虫草子实体管理阶段；(4)子实体管理：为刺激子实体原基形成，增加光照和温差刺激，每天散射光光照不少于10h，温度每天18℃，10h/25℃，14h的光照交替，相对湿度提高至80％左右，每天通风10min以补充新鲜空气；蛹虫草子座长出后，增加光照强度至1000LX，温度保持22℃左右，空气湿度85％左右；每天通风换气3次，每次10min；待子实体生长30天后，收获橙黄色的子实体；所述红曲为紫红曲M.purpureus菌株ATCC 16365；蛹虫草(Cordycepsmilitaris)为无性型蛹草拟青霉(paecilomyces militaris)PM-71菌株，此菌株已于2008年4月17日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏登记入册编号为：CGMCCNo.2459。