| 摘要 |
Die Erfindung betrifft einen autokatalytischen Proteinlinker, Fusionsproteine, die diesen umfassen, einen Expressionsvektor, einen Kit zur Herstellung derartiger Fusionsproteine sowie deren Verwendung im Bereich der Biochemie, der Biotechnologie und der Molekularbiologie, insbesondere bei der Proteinaufreinigung. Erfindungsgemäß wird ein autoproteolytischer Proteinlinker, der die DUF 1521-Domäne oder eine Teilsequenz davon umfasst, als Teil eines Fusionsproteins eingesetzt. Vorzugsweise ist die DUF 1521-Domäne ausgewählt aus den Sequenzen mit der SEQ ID No. 1 bis 5 oder einer homologen Sequenz mit wenigstens 70% Sequenzidentität (bevorzugt 80%, besonders bevorzugt 90%) zu mindestens einer dieser Sequenzen oder einer Teilsequenz davon. Eine Teilsequenz der DUF 1521-Domäne umfasst die für die autoproteolytische Aktivität benötigten Abschnitte der DUF 1521-Domäne sowie die Spaltstelle und umfasst vorzugsweise 140 AS, bevorzugt 100 AS, besonders bevorzugt 80 AS der Aminosäuresequenz der DUF 1521-Domäne. Das Fusionsprotein umfasst neben dem autoproteolytischen Proteinlinker mindestens ein weiteres Protein oder Peptid. Die autoproteolytische Spaltung dieses Proteinlinkers wird vorteilhaft durch die Zugabe von zweiwertigen Metallionen, bevorzugt ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Ca- und Mn-Ionen, induziert.
|
