一种温度两阶段控制策略发酵生产F.solani pisi角质酶的方法

摘要

一种温度两阶段控制策略发酵生产F.solani pisi角质酶的方法，属于环境因素分阶段控制策略在发酵过程优化中的应用技术领域。本发明采用分泌性表达载体重组芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WSHB 06-07为出发菌株，在菌体生长阶段控制温度37℃和pH为7.5，当菌4体的OD600达到12.65时，将温度调至30℃和pH调至6.5直到发酵结束。采用此策略进行发酵，最终实现了提高角质酶产量和生产强度的目的。本发明的优点在于工艺简单易行，能有效地提高角质酶的产量及生产强度，并能够减少发酵液中杂蛋白的含量，提高了产品纯度和下游提取时的效率，并且减少了能耗，有利于工业化大规模生产。

主权项

一种温度两阶段控制策略发酵生产F.solani pisi角质酶的方法，其特征是采用重组芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WSHB 06-07为出发菌株，两阶段控制策略发酵生产F.solanipisi角质酶：(1)菌体生长阶段控制温度为37℃、pH 7.5、搅拌转速600r/min、通气量为1.5vvm，直到菌体OD600达到12.65；(2)高效表达阶段当菌体OD600达到12.65，菌体生长进入对数生长期后，将发酵温度降到30℃、pH 6.5、搅拌转速600r/min、通气量为1.5vvm，直到发酵结束。