一种利用鹰嘴豆胞克鲁维酵母表达系统大规模制备外源蛋白的发酵工艺

摘要

本发明属于遗传工程和发酵工程领域，是利用含有外源蛋白编码序列的鹰嘴豆孢克鲁维酵母基因工程菌高效制备外源蛋白的发酵工艺。发酵时，取上述基因工程菌株发酵2-6天，然后去除菌体，即得；发酵液初始菌浓度OD值为0.4-0.6，在发酵过程中维持葡萄糖浓度为0.5-1％；在发酵过程的12h-18h连续补加12％酵母粉，补加酵母粉的总量为发酵体积的3-5％(质量体积比)；发酵过程中调节发酵液pH值为5.0-5.5。用本发明方法可以大规模制备外源蛋白，蛋白活性高，发酵产量高，发酵周期短，发酵成本低，适用于推广至大规模工业化生产。

主权项

一种利用鹰嘴豆胞克鲁维酵母表达系统大规模制备外源蛋白的发酵工艺，鹰嘴豆胞克鲁维酵母表达系统的宿主菌保藏号为CCTCC No.M202031，其特征是，将含有外源蛋白编码序列的鹰嘴豆胞克鲁维酵母基因工程菌株制备成种子液，转接发酵罐中，28-32℃条件下发酵2-6天，然后去除菌体即得；发酵液初始菌浓度OD值为0.4-0.6；在发酵过程中维持葡萄糖浓度为0.5-1％，质量体积比；在发酵过程的12h-18h连续补加12％酵母粉，补加酵母粉的总量为发酵体积的3-5％，质量体积比；发酵过程中发酵液pH值为5.0-5.5。