一种PEG化脂质体纳米颗粒

摘要

本发明涉及一种PEG脂质体纳米颗粒。本发明为颗粒表面PEG层中的一小部分末端修饰了对硝基苯碳酸酯(pNP)基团的脂质体纳米颗粒；本发明以氯甲酸对硝基苯酯(pNPC)对聚乙二醇两端进行活化，合成DPPE-PEG-pNP，将大豆磷脂，胆固醇，DPPE-PEG，DPPE-PEG-pNP以一定的摩尔百分比溶于有机溶剂中，用超声薄膜法制备脂质体纳米颗粒，在pH7.5～8.5的条件下，室温搅拌4～5小时，连接上活性分子；本发明的脂质体纳米颗粒制备过程简单易行，连接活性分子的条件温和，而且不影响物质的活性，连接的带氨基的活性分子具有广泛性。

主权项

一种PEG化脂质体纳米颗粒的制备方法，其特征在于：(1)活化PEG：用氯甲酸对硝基苯酯活化PEG2000两端，氯甲酸对硝基苯酯与PEG2000的投料摩尔比在4∶1至6∶1之间，将反应物溶于乙腈，加入三乙胺，在无水、室温条件下反应12～14小时，在除去结晶物的滤液中加入乙醚重结晶，置于4℃冰箱中过夜，过滤得到的结晶重新溶于乙腈，用相同步骤重复重结晶一次，最后20℃真空干燥箱中干燥得PEG-(pNP)2；(2)合成DPPE-PEG-pNP：将PEG-(pNP)2与二棕榈酰磷脂酰乙醇胺以8∶1至10∶1的摩尔比溶于氯仿中，加入少量三乙胺，在氮气保护下，温度50℃左右反应10～12小时，除去结晶物的滤液在真空旋转蒸发仪上蒸出有机溶剂后，加入pH4.5～5.5的PBS缓冲液，超声水化成脂质体颗粒，过Cl-4B凝胶柱，氯仿萃取后得DPPE-PEG-pNP；(3)制备脂质体纳米颗粒，将原料按如下摩尔百分比：大豆磷脂35％～45％，胆固醇45％～55％，DPPE-PEG 5％～9％，DPPE-PEG-pNP 2％～8％，溶于有机溶剂中，用超声薄膜法制备脂质体纳米颗粒。