应用真菌诱导龙血树产生血竭的方法

摘要

本发明属于生物技术领域，涉及一种利用真菌诱导龙血树产生血竭的技术方法，所用的1株真菌为镰孢属(Fusarium sp.)真菌D-22，内容包括真菌的培养方法和真菌的接种方法。应用该项技术，可以诱导龙血树的树干分泌产生与血竭化学成分相似的红色物质。该项技术工艺简便，生产成本低，周期短，充分地利用和保护了龙血树资源，便于推广应用。

主权项

一种应用真菌诱导龙血树产生血竭的方法，包括步骤：(1)真菌的培养将由龙血树分离得到的保藏编号为CGMCC No.2598的真菌D-22自低温保藏的斜面试管菌种活化后，转接于PDA培养基的平皿中，恒温培养15-20天；或转接于PDA液体培养基或麦麸液体培养基中，恒温震荡培养5-15天，或转接于锯末麦麸固体培养基中，恒温培养20-50天；将上述培养的菌种接种到锯末复合固体培养基中进行培养，待菌丝长满培养基后直接使用；锯末复合固体培养基含有锯末、树叶和麦麸，它们的重量比为2∶1∶0.5；或PDA平皿培养的菌种，在菌落边缘打孔成菌片，接入PDA液体培养基或麦麸液体培养基中，培养5-15天后取发酵物使用；(2)真菌的培养特性保藏编号为CGMCC No.2598的菌株D-22为镰孢属(Fusarium sp.)真菌，在PDA培养基上菌落为粉色，气生菌丝丝状，菌落背面为红褐色，分泌红褐色物质，生长1周菌落直径为5.2cm；小型分生孢子单胞，椭圆形，有时两端略弯曲，3.4-12.1×1.4-3.4μm；大型分生孢子，多胞，镰刀形，37.6×4.0μm，少见；(3)真菌的接种接种真菌的方法为：选取树龄5年以上的龙血树树干，通过钻孔或挖槽的方式在树干形成直径0.5-3cm，深2-15cm的接种孔或长1-6cm，宽1-6cm，深1-6cm的接种槽；在接种孔或接种槽中接入锯末复合固体培养基培养的菌种，或接入液体培养基培养的发酵物；接种后用聚丙烯薄膜包扎接菌孔或接种槽；用上述方法在龙血树的树干上接种真菌一次，或在第一次接种真菌后，在接种孔周围形成血竭样红色物质的初期或中期，在原接种部位或在红色物质形成区域中，用上述方法重复接种真菌。