天山雪莲愈伤组织培养方法

摘要

本发明公开了一种天山雪莲愈伤组织培养方法，它包括如下步骤：植物体的选择及无菌处理、愈伤组织诱导培养和大规模培养三个环节，其核心技术是选用如下大规模培养基，MS+蔗糖0～50g/L+琼脂0～10g/L+α-萘乙酸0.1～5.0mg/L+6-苄氨基嘌呤0.1～5.0mg/L；在大规模培养中加入非生物诱导子SNP 40～60μmol/L+MJ 40～60μmol/L+SA 40～60μmol/L。该方法易操作，有效成分含量高，生产成本低，不污染环境，可达到产业化水平。用本发明方法培养技术生产紫丁香苷，不变性、含量高、成本低、周期短、极具市场竞争力。

主权项

一种天山雪莲愈伤组织培养方法，它包括如下步骤：a、植物体的选择及无菌处理：选择6～8月份海拔3500～4000m以上的野生天山雪莲新鲜植株，取其幼茎及叶片进行清洗和无菌处理，制的0.3～0.5cm2大小的天山雪莲组织；b、愈伤组织诱导培养：将经过无菌处理后的天山雪莲组织在诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养，培养时间：1～24天，培养温度：15～30℃，光照时间：1～24小时/天，光照强度：0～100μmol/m2·s；所述的诱导培养基为：基本培养基MS+蔗糖0～50g/L+琼脂0～10g/L+α-萘乙酸0.1～5.0mg/L+6-苄氨基嘌呤0.1～5.0mg/L，pH值为5.0～7.0；c、大规模培养：选取经过诱导培养产生的紫绿色愈伤组织，在大规模培养基中进行培养，培养时间：10～24天，培养温度：10～30℃，光照时间：0～24小时/天，光照强度：0～100μmol/m2·s；所述的大规模培养基为：基本培养基MS+蔗糖0～50g/L+琼脂0～10g/L+α-萘乙酸0.1～5.0mg/L+6-苄氨基嘌呤0.1～5.0mg/L，pH值为5.0～7.0；在大规模培养的0～20天内往培养基中加入非生物诱导子SNP、MJ和SA，其中，SNP 10～100μmol/L+MJ 10～100μmol/L+SA 10～100μmol/L。