一种检测牛奶中青霉素残留量的方法

摘要

本发明公开了一种检测牛奶中青霉素残留量的方法。配制青霉素钠标准工作无水乙醇液，用稀HCl调至pH 2±0.5或4±0.5，沸水浴得到降解产物青霉胺或青霉烯酸，两种降解产物再分别与苯醌类物质发生反应，得到荷移复合物，计算不同荷移复合物的工作曲线。检测时以同样的方法计算牛奶样品的荷移复合物的吸收度，代入该类荷移复合物的工作曲线中即可求得牛奶中青霉素的残留量。本发明率先实现了直接用紫外或荧光分光光度法测定牛奶中的青霉素残留量。该方法检测速度快，检测范围宽，灵敏度高，准确率高，选择性好，无需购置昂贵的抗生素检测仪器，操作方法简单，为乳品加工企业降低生产成本、减轻运作风险提供了保证，具有良好的应用前景。

主权项

一种检测牛奶中青霉素残留量的方法，包括以下步骤：(1)青霉素的降解及荷移复合物的形成：配制青霉素钠浓度0.01～100mg/L的标准工作无水乙醇液，用稀HCl调至pH 2±0.5或4±0.5，沸水浴10～30min使其降解，得到降解产物青霉胺或青霉烯酸，两种降解产物再分别与浓度为1×10-3～10×10-3mol/L的苯醌类物质在常温下反应5～10min，得到荷移复合物，备用；(2)测定波长的选择：将步骤1得到的青霉胺荷移复合物在紫外分光光度计下测定紫外最大吸收波长，或是将得到的青霉烯酸荷移复合物在荧光分光光度计下测定荧光的激发和发射光谱；其中，所述的紫外吸收或是荧光的激发发射波长的测定选择范围为200nm～600nm；(3)针对不同的荷移复合物分别计算吸收光强度与荷移复合物的线性范围、回收率、标准偏差、检测限和工作曲线；(4)样品前处理：将牛奶样品与脱蛋白、脱脂肪沉淀剂混合均匀，在转速800～3000r/min条件下离心分离3～10min，取上清液备用；(5)样品测定：取步骤4中的上清液，按照步骤1进行降解、荷移反应，得到相应的荷移复合物，再按照步骤2的要求测定紫外最大吸收波长或荧光的激发和发射光谱，计算该荷移复合物的吸收度，代入步骤3所得的该类荷移复合物的工作曲线中即可求得牛奶中青霉素的残留量。