口蹄疫A型灭活疫苗

摘要

一种口蹄疫A型灭活疫苗，由A型口蹄疫病毒抗原和佐剂以抗原：佐剂＝1:1比例经：毒种、增殖病毒的程序、病毒灭活的程序、菌检、疫苗配制程序和疫苗检验步骤制备而成。本发明的安全性达国际同类产品先进水平；对A型口蹄疫的平均免疫效力为7.27PD50/头份，超过了国际上战略应急疫苗的标准。因此，是高效的口蹄疫A型灭活疫苗，具有广阔的应用前景。免疫接种剂量缩减到了每头牛2ml，从而在不影响疫苗免疫效力的前提下，大大降低了疫苗的副反应，也降低了用于防疫的人力、物力和财力。

主权项

1. 一种口蹄疫A型灭活疫苗，其特征在于由A型口蹄疫病毒抗原和佐剂按下述含量配制而成：抗原，由已灭活的A型口蹄疫病毒抗原AF/72占疫苗总量的50％；佐剂：为蒙太得206—Montanide ISA 206佐剂，佐剂占疫苗总量的50％；疫苗配制的比例为，抗原:佐剂＝1:1；上述含量原料按照下述工艺方法和顺序制备而成：a、毒种牛源A型口蹄疫病毒AF/72株细胞毒；b、增殖病毒的程序b. 1制苗材料的制备：制苗材料为BHK-21单层细胞，培养按一般组织培养方法进行；b. 2病毒的增殖：用15L转瓶BHK-21细胞通过浓缩培养法增殖制苗用A型病毒抗原，转瓶机转速为10～12r/h，收获病毒液，在-15℃下冻结保存；c. 病毒灭活的程序c. 1过滤：将冻结的A型制苗病毒液融化，经60～80目铜纱网过滤除细胞碎片，用7.5％NaHCO3调PH至7.6～7.8，并加200u/mL的青霉素、200μg/mL的链霉素；c. 2灭活：向已过滤的A型病毒液中加入BEI二乙烯亚胺使其浓度达到2mmol/L，在37℃温室或发酵罐夹套水浴循环升温至30℃，并在30℃下持续灭活26h，其间每4h摇振1次，灭活终止期加入过滤除菌的50％硫代硫酸钠溶液，置2～8℃冷库或发酵罐冰盐水保温待检；c. 3安检：取2～4日龄乳鼠，颈背部皮下接种灭活病毒液，每只0.2mL，另取对照乳鼠，不接种；接种后，将乳鼠与母鼠一起饲养，连续观察7d，不出现口蹄疫症状和死亡；c. 4菌检：d、疫苗配制程序疫苗乳化，先将油佐剂相真空负压进料到乳化机内，将灭活的病毒液按比例真空负压进料到油佐剂相中，循环搅拌至抗原与佐剂充分混合后，乳化成略带粘滞性的双相油乳剂疫苗；e、疫苗检验e. 1物理性状检查；e. 2无菌检验；e. 3安全检验；e. 4效力检验。