发明名称 一种HBV病毒rtN236T突变的荧光扩增检测试剂盒
摘要 本发明涉及一种HBV病毒rtN236T突变的荧光扩增检测试剂盒。本发明针对rtN236T变异(即236AAC/T→ACC/T突变)设计了一对引物和分别用两种荧光染料标记的一对特异性探针,在单管内使用双色荧光定量PCR技术实现了分别对野生株(rt236N)和突变株(rt236T)HBV DNA进行荧光扩增检测。本发明技术能快速的对HBV DNA rt236N和rt236T同时进行定性检测。
申请公布号 CN101760558A 申请公布日期 2010.06.30
申请号 CN200810201646.0 申请日期 2008.10.23
申请人 上海复星医药(集团)股份有限公司;上海复星医学科技发展有限公司 发明人 何剑军;吴大治;夏懿
分类号 C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 主分类号 C12Q1/70(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种HBV病毒rtN236T突变的荧光扩增检测试剂盒,其特征在于包含一对特异性引物和一对特异性探针,扩增目标片段长度为132bp,引物序列为:引物1:5`-GTACAACATCTTGAGTCCCTTTT-3`(Seq No.1)引物2:5`-CCAACTTCCAATTACATATCCC-3`(Seq No.2)或者上述引物序列的互补序列,或者上述序列同源性大于75%的序列。设计的两条探针方向相反,除突变检测位点和3’端外(突变检测位点序列可互补,也可不互补,根据检测要求决定)其余区域基本互补;探针1和探针2的Tm值相近,同时也与两条引物的Tm值相近(相互间的差异均小于3℃),两条探针的3’端除互补序列外均延伸2-4个碱基;探针1与rt236T基因序列互补,探针2与rt236N基因序列互补,分别用于检测变异株(rt236T)和野生株(rt236N),探针序列为:探针1:5`-CATACATTTGACTCCTAACAAAACC-3`(Seq No.3)探针2:5`-TTGTTAGGGTTTAAATGTATGCC-3`(Seq No.4)或者上述引物序列的互补序列,或者上述序列同源性大于75%的序列。
地址 200010 上海市黄浦区复兴东路2号