在奶中产生外源蛋白的转基因哺乳动物

摘要

本发明涉及用于生产对哺乳动物可能有毒的目标蛋白的非人转基因动物。该哺乳动物的特征在于以下事实：其是转基因的，用于在其奶中产生失活形式的目标蛋白，优选重组人胰岛素。不可能在转基因哺乳动物中产生重组人胰岛素，因为该分子在哺乳动物中具有一定程度的生物活性，并可能对哺乳动物是有毒的。因此，本发明涉及克隆遗传构建体，该遗传构建体包含编码修饰的人胰岛素前体的序列，该序列处于表达载体中的β酪蛋白启动子的控制下。本发明还包括将该表达质粒转染至胎牛体细胞，如成纤维细胞中，并通过核移植将牛卵母细胞去核来产生转基因胚胎。本发明产生了能够在其乳腺中产生修饰的人胰岛素前体的转基因牛。此后，可以收集这些转基因哺乳动物的奶，可以在体外将修饰的人胰岛素前体转化成重组的人胰岛素，并将重组的人胰岛素纯化至作为纯生物药品的同质性。

主权项

生产胰岛素的方法，包括：a)制备在其奶中产生修饰的胰岛素前体的非人转基因哺乳动物；b)从非人转基因哺乳动物获得奶；c)从奶中纯化修饰的胰岛素前体，得到纯的修饰的胰岛素前体；d)将纯的修饰的胰岛素前体转化成胰岛素；和e)纯化胰岛素。