发明名称 |
一种构建人单克隆抗体片段复合物的方法 |
摘要 |
本发明涉及一种构建人单克隆抗体片段复合物的方法,包括:(1)从人全血中分离B细胞,并从人微量B细胞中扩增人抗体重链和轻链基因片段;(2)从步骤(1)中获得的基因片段用RT-PCR方法获得人抗体的轻链和重链功能性片段,分别克隆进表达载体pCABHCV和pCABLCV;(3)用pCABHCV和pCABLCV双转化大肠杆菌JM109或BL21,人抗体重链或轻链片段表达后,同时分泌于培养液上清,并形成人单克隆抗体片段复合物。与现有技术相比,本发明构建人单克隆抗体片段复合物的方法工艺先进独特,操作简单,制得的人单克隆抗体片段复合物和抗原特异性结合优良、专一性强,使用安全,有应用于人癌症或传染性疾病的检测和治疗的可能性。 |
申请公布号 |
CN101748130A |
申请公布日期 |
2010.06.23 |
申请号 |
CN200810204695.X |
申请日期 |
2008.12.16 |
申请人 |
上海凯勃生物技术有限公司 |
发明人 |
龚祖埙;吴鸿菲;吴建华;张祖传;张奉武;沈菊英;姚亚媄 |
分类号 |
C12N15/13(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C07K16/18(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/13(2006.01)I |
代理机构 |
上海科盛知识产权代理有限公司 31225 |
代理人 |
赵志远 |
主权项 |
一种构建人单克隆抗体片段复合物的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)从人全血中分离B细胞,并从人微量B细胞中用RT-PCR方法扩增人抗体重链和轻链基因片段;(2)从步骤(1)中获得的基因片段,分别克隆进表达载体pCABHCV和pCABLCV;(3)用pCABHCV和pCABLCV双转化大肠杆菌JM109或BL21,人抗体重链和轻链片段表达后,同时分泌于培养液上清,并形成复合物,该复合物为人单克隆抗体片段复合物。 |
地址 |
201108 上海市闵行区金都路4299号D幢2057号 |