发明名称 一种构建人单克隆抗体片段复合物的方法
摘要 本发明涉及一种构建人单克隆抗体片段复合物的方法,包括:(1)从人全血中分离B细胞,并从人微量B细胞中扩增人抗体重链和轻链基因片段;(2)从步骤(1)中获得的基因片段用RT-PCR方法获得人抗体的轻链和重链功能性片段,分别克隆进表达载体pCABHCV和pCABLCV;(3)用pCABHCV和pCABLCV双转化大肠杆菌JM109或BL21,人抗体重链或轻链片段表达后,同时分泌于培养液上清,并形成人单克隆抗体片段复合物。与现有技术相比,本发明构建人单克隆抗体片段复合物的方法工艺先进独特,操作简单,制得的人单克隆抗体片段复合物和抗原特异性结合优良、专一性强,使用安全,有应用于人癌症或传染性疾病的检测和治疗的可能性。
申请公布号 CN101748130A 申请公布日期 2010.06.23
申请号 CN200810204695.X 申请日期 2008.12.16
申请人 上海凯勃生物技术有限公司 发明人 龚祖埙;吴鸿菲;吴建华;张祖传;张奉武;沈菊英;姚亚媄
分类号 C12N15/13(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C07K16/18(2006.01)I 主分类号 C12N15/13(2006.01)I
代理机构 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 代理人 赵志远
主权项 一种构建人单克隆抗体片段复合物的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)从人全血中分离B细胞,并从人微量B细胞中用RT-PCR方法扩增人抗体重链和轻链基因片段;(2)从步骤(1)中获得的基因片段,分别克隆进表达载体pCABHCV和pCABLCV;(3)用pCABHCV和pCABLCV双转化大肠杆菌JM109或BL21,人抗体重链和轻链片段表达后,同时分泌于培养液上清,并形成复合物,该复合物为人单克隆抗体片段复合物。
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