一种α1-抗胰蛋白酶药物的制备方法

摘要

本发明公开了一种α1-抗胰蛋白酶药物的制备方法，具体涉及从人血浆分离的组分IV-1中纯化α1-抗胰蛋白酶药物。本发明包括以下步骤：将组分IV-1溶于缓冲液中，加入PEG，沉淀后提取上层清液，在对上层清液进行S/D法病毒灭活、阴离子交换层析得到α1-抗胰蛋白酶洗脱液，接着对获取的α1-抗胰蛋白酶洗脱液超滤、分子筛层析，收集活性峰值范围内的流出液，然后对流出液进行超滤、浓缩、DV20纳米膜过滤，所得滤液经分装、冷冻干燥得到α1-抗胰蛋白酶成品。本发明操作简便，缩短了生产时间，提高了效率与收率，收率≥70％，比活≥0.8，所得产品具有高纯度，纯度≥95％。

主权项

一种α1-抗胰蛋白酶药物的制备方法，其特征是包括以下步骤：a选取组分IV-1溶于pH为8.1～8.5的0.1MTris+25mMNaCl缓冲液中，在2～10℃溶解1h，然后升温至34～40℃恒温60～80分钟，调整pH至6.8，再降温至2～10℃，向缓冲液中加入PEG，调整pH至5～5.2，搅拌20～40分钟，在2～8℃静置一段时间，沉淀后提取上层清液；b对上层清液依次进行S/D病毒灭活、阴离子交换层析，得到α1-抗胰蛋白酶洗脱液；c对步骤b中所获取的α1-抗胰蛋白酶洗脱液进行超滤得到滤液1，接着对滤液1进行分子筛层析，收集活性峰值范围内的流出液；d对步骤c中所获取的流出液进行超滤、浓缩得到浓缩液，选取适量浓缩液，配制pH为6.6～7.4的20mM磷酸缓冲液，接着进行DV20纳米膜过滤，得到滤液2，滤液2经分装、冷冻干燥得到α1-抗胰蛋白酶成品。