制备高纯度白蛋白溶液的方法

摘要

本发明提供了制备高纯度白蛋白溶液的方法，该方法包括对白蛋白(优选由转化的酵母表达和分泌的)进行一系列层析步骤。优选此方法包括主动方式阳离子交换层析，主动方式阴离子交换层析，主动方式亲和层析，被动方式亲和层析(优选使用固相化氨基苯硼酸)，被动方式阳离子交换层析，和被动或主动方式阴离子交换层析。本发明还公开了用于降低白蛋白溶液中镍的水平的方法，以及一种重组白蛋白编码序列，其含有两个或多个位于同一读码框架内的翻译终止密码子。本发明还公开了产生重组白蛋白的方法，该方法包括培养能表达重组白蛋白编码序列的真菌细胞，其中所述细胞使重组表达的白蛋白发生甘露糖基化的能力降低。

主权项

用于纯化白蛋白溶液的方法，此方法包括对pH8.0-9.5，用包含5-250mM的二价阳离子的缓冲液缓冲的、电导率在1-75mS.cm-1范围内的起始白蛋白溶液进行亲和层析步骤，该步骤就白蛋白而论为被动方式，其利用含有固相化二羟基硼基的亲和介质，从而获得纯化的白蛋白溶液。