具有增加的2-酮基-D-葡萄糖酸累积的代谢工程细菌株

摘要

本发明涉及通过失活内源性膜结合2-酮基-D-葡萄糖酸脱氢酶(2-KDGDH)改变细菌宿主细胞以积累2-酮基-D-葡萄糖酸(2-KDG)的方法，2-酮基-D-葡萄糖酸脱氢酶在失活之前催化2-KDG转变为2，5-二酮基葡萄糖酸(2，5-DKG)。

主权项

增加细菌宿主细胞中2-酮基-D-葡萄糖酸(2-KDG)累积的方法，包括：a)在细菌宿主细胞中失活至少一个内源性基因，以得到改变的细菌细胞，其中，在碳源存在下，所述细菌宿主细胞能够从2-KDG的酶促转变产生2，5-二酮基葡萄糖酸(2，5-DKG)，所述内源性基因是2-酮基-D-葡萄糖酸脱氢酶(2-KDGDH)活性所需的；和b)在合适的培养条件下培养改变的细菌细胞，产生2-KDG，其中2-KDGDH由三个亚基组成，其中第一个亚基由SEQ ID NO：2的氨基酸序列组成，第二个亚基由SEQ ID NO：4的氨基酸序列组成，第三个亚基由SEQ ID NO：6的氨基酸序列组成。