一种抗人血清/浆中高丰度蛋白卵黄抗体IgY的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及一种抗人血清/浆高丰度蛋白卵黄抗体IgY的制备方法及其应用，本发明用经过高丰度蛋白免疫后母鸡的蛋作为提取抗体的来源。制备步骤是对经过免疫后的母鸡以间接ELISA法检测血清效价，效价达标后，获取含高效价抗体的鸡蛋。将鸡蛋卵黄液经酸性水解，冻融，过滤后，硫酸铵沉淀。最后再经过DEAE离子交换层析进一步纯化得到卵黄抗体IgY。人血清/浆高丰度蛋白是指白蛋白，IgG，转铁蛋白，C3补体，IgA，IgM，胰蛋白，珠蛋白，脂蛋白，F因子，C9补体，C4补体，铜蓝蛋白，载脂蛋白B，载脂蛋白A-1，α-1-酸性糖蛋白，H因子，补体因子B，前白蛋白，C1q补体等浓度高于10μg/ml的高丰度蛋白。

主权项

一种抗人血清/浆中高丰度蛋白卵黄抗体IgY的制备方法，其特征在于：所述制备过程包括以下步骤(1)收集经过高丰度蛋白免疫后母鸡所产的含高效价抗体的鸡蛋。所述含高效价抗体的鸡蛋是这样确定的：用间接ELISA法检测经过高丰度蛋白免疫后母鸡血清的效价，效价达标后即为高效价抗体鸡蛋；(2)从高价效抗体鸡蛋中分离提取抗高丰度蛋白卵黄抗体IgY：将所述高效价抗体鸡蛋的卵黄液经酸性水稀释，经冻融，过滤得到含卵黄抗体IgY的水溶液，硫酸铵沉淀粗纯，DEAE离子交换层析即可分离得到纯化的高丰度蛋白卵黄抗体IgY。