鳐血管生成抑制因子1功能区的制备及在防治肿瘤药物中的应用

摘要

一种鳐血管生成抑制因子1功能区的制备及在防治肿瘤药物中的应用，用基因工程技术实现鳐血管生成抑制因子1功能区的克隆、表达及重组；重组的鳐血管生成抑制因子1功能片段具有以下生物活性：抗血管生成、抗肿瘤生长及转移作用，急性毒性试验，稳定性试验。用鳐血管生成抑制因子1功能区与可药用的载体混合或溶解，制得治疗各种肿瘤的药物。本发明提供的鳐血管生成抑制因子1功能区具有更强的作用专一性，具有易于表达，降解率低等基因工程药物的特征，有强抗血管生成、强抗肿瘤生长和转移的效果；提供的基因工程技术可工厂化生产鳐血管生成抑制因子1功能区；基因工程技术生产的鳐血管生成抑制因子1功能区可用于制备抑制血管生成、防治肿瘤的药物。

主权项

一种鳐血管生成抑制因子1功能区的制备及在防治肿瘤药物中的应用，其特征是采用酶切、PCR技术对鳐血管生成抑制因子1cDNA进行改造，获得去除突变体的基因片段，将其分别克隆入带有GST或HIS标记的原核表达载体pGEX-2T，随后将质粒转入E.coli BL21进行表达，用GST或HIS特异的纯化柱进行纯化，切除GST/HIS或保存GST或HIS标记，利用FPLC技术纯化所需片段，重组的鳐血管生成抑制因子1功能区肽段应该具有或超过鳐血管生成抑制因子1的生物学效能，根据鳐血管生成抑制因子1功能区进行抗血管生成和抗肿瘤生长、转移实验的结果，确定鳐血管生成抑制因子1的有效功能区，并解析其结构，即氨基酸残基的组成和顺序；鳐血管生成抑制因子1功能区与可药用的载体混合或溶解，制成片剂、颗粒剂、粉剂、胶囊剂，或液体形式的针剂、可用于各种实体形肿瘤，如食道癌、肝癌、胃癌、胰腺癌、结肠癌、直肠癌、宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、鼻咽癌、口腔癌、唇癌、皮肤癌、膀胱癌、绒毛膜上皮癌、腮腺瘤、淋巴瘤、骨瘤、黑色素瘤和各种颅内肿瘤等的治疗，及其在需要这种治疗的入中的应用。