从败酱草中精确提取抗病毒的败酱草多糖的方法

摘要

从败酱草中精确提取抗病毒的败酱草多糖的方法，它涉及一种提取抗病毒的败酱草多糖的方法。本发明解决了现有技术提取的败酱草多糖存在含有对抗病毒无效的蛋白质成分及核酸的问题。本发明从败酱草中提取有效抗病毒部位的败酱草多糖的方法按如下步骤进行：一、配制溶液；二、除去蛋白；三、重复步骤二；四、加入乙醇沉淀；五、层析，抽滤；即得到败酱草中抗病毒有效部位的败酱草多糖。本发明提取的抗病毒有效部位的败酱草多糖不含对抗病毒无效的蛋白成分及核酸，抗病毒效果明显，安全性高。

主权项

从败酱草中精确提取抗病毒的败酱草多糖的方法，其特征在于从败酱草中提取有效抗病毒部位的败酱草多糖的方法按如下步骤进行：一、将从败酱草中提取的粗提洗脱物用蒸馏水溶解成浓度为80～120mg/mL的洗脱物溶液；二、加入洗脱物溶液体积1/6～1/4的氯仿和洗脱物溶液体积1/18～1/12的正丁醇，震荡15～30min，再将混合液以3500～4000r/min的速度离心12～18分钟，除去交界处的变性蛋白和下层混浊液；三、将上层水溶液重复步骤二的操作3～7次，得到脱蛋白溶液；四、加入脱蛋白溶液体积5倍、质量浓度为95％的乙醇进行沉淀，再静置8～14小时，分离沉淀和上清液；五、取沉淀用蒸馏水溶解后重复步骤四的操作5次，收集沉淀并将沉淀用冷冻干燥机抽滤成粉末，再用蒸馏水溶解成浓度为1g/mL的溶液，将溶液上样于大孔树脂柱上，用蒸馏水以5.00mL/min流速进行洗脱，将精提洗脱物进行减压浓缩至败酱草多糖的浓度大于1g/mL，将浓缩液用冷冻干燥机抽滤成粉末；即得到抗病毒的败酱草多糖；步骤一中从败酱草中提取的粗提洗脱物是按以下方法和步骤制备的：将败酱草1kg用自来水清洗5次，用蒸馏水清洗3次，7000mL蒸馏水浸泡12小时，于100℃煮沸90分钟后用脱脂棉过滤，药渣加5000mL蒸馏水于100℃煮沸90分钟，用脱脂棉过滤，将两次滤液混合，混合滤液减压浓缩，浓缩至每毫升水提液含1克生药；然后用水醇法制备乙醇沉淀物，向浓缩的水提液中缓慢加入95％的乙醇，并不断搅拌，直至乙醇体积达到20％～90％后，于4℃温度下放置12小时，于3500转/分离心10分钟，过滤收集沉淀，将乙醇沉淀物加水溶解后，加在预处理好的大孔吸附树脂柱顶端，用水洗脱，洗脱液减压浓缩，干燥，得粗提洗脱物。