一种阿魏酸酯酶活性的检测方法

摘要

本发明提供了一种阿魏酸酯酶活性检测方法，包括将待测酶液与阿魏酸甲酯溶液混合反应，然后计算酶活性。本发明在1个96孔板上即可完成12个样品的检测，且样品用量极低，不仅简化了检测阿魏酸酯酶活性的步骤，而且大大节省了时间，降低了工作密度，同时测定结果精确，可操作性强，适合阿魏酸酯酶活性的批量检测工作。

主权项

1.一种阿魏酸酯酶活性检测方法，包括步骤：将待测酶液与阿魏酸甲酯溶液混合进行反应，检测反应体系在反应起始及终止时的OD值，检测酶空白反应体系在反应起始及终止时的OD值，并通过下述公式计算酶活：其中，OD_反应起始：反应起始反应体系的OD值；OD_反应终止：反应终止反应体系的OD值；OD_{酶空白起始}：不加待测酶反应起始反应体系的OD值；OD_{酶空白终止}：不加待测酶反应终止反应体系的OD值；V_体系：反应体系的总体积；l：光程厚度(cm)；ε_{阿魏酸甲酯}：阿魏酸甲酯的消光系数；ε_阿魏酸：阿魏酸的消光系数；V_样品：待测酶液的体积；其特征在于，所述的OD值是在340nm下用酶标仪检测；所述的待测酶液的制备步骤包括：在有96个孔的板上加入50～100μL适当稀释6～1600倍的待测酶液，35～65℃预热10～30分钟。