北冬虫夏草菌丝体中多种有效成分的综合提取方法

摘要

本发明提供了一种北冬虫夏草菌丝体中多种有效成分的综合提取方法。将干燥粉碎的北冬虫夏草菌丝体先用有机溶剂提取、过滤，得滤液和残留物；将滤液浓缩回收溶剂，浓缩液经皂化、萃取、干燥，可得虫草甾醇；将残留物用水提取、过滤，滤液经浓缩、醇沉、离心，得沉淀物和上清液；将沉淀物溶解于水中进行除蛋白等操作，可得虫草多糖；将离心上清液通过离子交换树脂柱、结晶等手段，可得虫草素。该方法节省原材料，所得提取物纯度较高，成本较低，操作简单，能实现北冬虫夏草菌丝体中多种有效成分的综合提取。

主权项

一种北冬虫夏草菌丝体中多种有效成分的综合提取方法，其特征是按以下步骤进行：(1)虫草甾醇的提取提取：向干燥、粉碎后的北冬虫夏草菌丝体中加入有机溶剂，按每1克菌丝体加入3～40毫升有机溶剂，30～95℃下提取0.5～5小时，过滤，重复提取1～4次，将每次所得的滤液混合，残留物备用；其中所述的有机溶剂是正己烷、正丁烷、环己烷、丙酮、石油醚中的一种；浓缩：将滤液在温度30～95℃、常压或减压下浓缩至无有机溶剂味，回收有机溶剂，得浓缩物；皂化：常温下每1克浓缩物中加入0.2～5毫升碱性溶液，混匀，静置0.5～24小时，除去下层可皂化物，得不皂化液，重复皂化1～3次，其中所述的碱性溶液是浓度为1％至50％的氢氧化钠或氢氧化钾溶液；萃取：向不皂化液中加入0.2～10倍体积的有机溶剂，混匀，静置0.5～24小时，分取有机溶剂层，得萃取液，重复萃取1～5次，其中所述的有机溶剂是正己烷、正丁烷、环己烷、丙酮、石油醚中的一种；干燥：将萃取液在30～95℃下常压或减压浓缩至无有机溶剂味，回收有机溶剂，浓缩物经干燥处理后，得虫草甾醇；(2)虫草多糖的提取提取：将步骤(1)提取虫草甾醇后的残留物加水，按每1克残留物加入3～20毫升水，混匀，50～100℃提取0.5～4小时，过滤，得滤液和水提残留物，重复提取1～4次；浓缩：将滤液在50～100℃、减压或常压下浓缩至原体积的1/3～1/8，得浓缩液；第一次醇沉：向浓缩液中加入2～6倍体积的乙醇，置于-15～40℃下0.5～48小时；过滤：将醇沉溶液过滤，可得滤液和滤饼，滤饼为粗虫草多糖；除蛋白：将粗虫草多糖溶于0.1～10倍体积水后，再加入0.5～3倍体积的Sevage试剂除蛋白，重复1～6次；第二次醇沉：经过除蛋白的粗虫草多糖液中加入2～5倍体积的乙醇，置于-15～40℃下0.5～24小时；过滤：将醇沉溶液过滤，得滤液和滤饼；干燥：将滤饼置于25～100℃、减压或常压下烘干，得高纯度虫草多糖；(3)虫草素的提取浓缩：取步骤(2)两次醇沉后的滤液混合，在40～80℃、常压或减压下浓缩至无乙醇味，得浓缩液；调pH：取浓缩液用酸性溶液调pH至1.5～6.0，其中所述的酸性溶液是浓度为1％至50％的盐酸或硫酸溶液；柱层析：选取阳离子交换树脂，装柱，按说明书预处理树脂；将上述pH调好的浓缩液上阳离子交换柱，然后用碱性溶液洗脱，收集碱性溶液洗脱液，其中所述的碱性溶液是0.05～5.0mol/L的氨水；结晶：将洗脱液在50～100℃、常压或减压下浓缩至干，加热乙醇溶解，置于-15～25℃中结晶，收集晶体，置于25～100℃烘干，得高纯度虫草素。