发明名称 一种发酵乳制品中乳酸菌种类快速检测的方法
摘要 本发明涉及一种发酵乳制品中乳酸菌种类快速检测的方法。该方法应用聚合酶链式反应技术与变性梯度凝胶电泳技术相结合的方法,通过对乳酸16S rDNA V3可变区域的扩增和对聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱的分析来确定乳酸菌菌种的有无,从而在两个工作日内快速完成对发酵乳制品中乳酸菌种类的检测。
申请公布号 CN101717828A 申请公布日期 2010.06.02
申请号 CN200910250669.5 申请日期 2009.12.14
申请人 内蒙古农业大学 发明人 张和平;张家超;刘文俊;包秋华;孙志宏
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京君智知识产权代理事务所 11305 代理人 向华
主权项 一种发酵乳制品中乳酸菌种类快速检测的方法,其特征在于所述法包括如下步骤:(1)宏基因组DNA的提取提取样品中宏基因组DNA,获得样品DNA模版;(2)16S rDNA V3区的扩增用引物对SEQ ID No.1和SEQ ID No.2对样品DNA模版中的16S rDNA V3区进行扩增,获得PCR产物,其中引物对的核苷酸序列如下:SEQ ID No.1:5’-CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGCACGGGGGCCTACGGGAGGCAGCAG-3’SEQ ID No.2:5’-ATTACCGCGGCTGCTGG-3’(3)琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,检测扩增效果;(4)变性梯度凝胶电泳将PCR产物进行浓缩,然后进行变性梯度凝胶电泳,将样品的电泳结果与参考菌珠制成的比对标准条带进行对比,确定样品中含有的菌种种类。
地址 010018 内蒙古自治区呼和浩特市昭乌达路306号