无溶剂系统中固定化全细胞酶催化生产植物甾醇酯的方法

摘要

本发明涉及一种生产植物甾醇酯的方法。无溶剂系统中固定化全细胞酶催化生产植物甾醇酯的方法，其特征在于它包括如下步骤：1)固定化全细胞酶的制备；2)酯化：将油酸、月见草油或食用大豆油中加入甾醇和固定化全细胞酶，置于水浴恒温振荡器中在温度40～60℃、转速100～300r/min的条件下进行酯化反应，反应时间46～50h，得酯化后的反应产物；其中，油酸、月见草油或食用大豆油与甾醇的质量比为3～7∶1；固定化全细胞酶为下述：(1)油酸、月见草油或食用大豆油，(2)甾醇，二种质量之和的1.0～1.7％；3)离心分离、干燥：将酯化后的反应产物离心分离，离心后的上层液为植物甾醇酯产品。本发明工艺制作简单、成本低、多次使用、环保并可适于工业化生产。

主权项

无溶剂系统中固定化全细胞酶催化生产植物甾醇酯的方法，其特征在于它包括如下步骤：1)固定化全细胞酶的制备：(1)将葡技根霉(Rhizopus stolonifer)按常规方法配制成102～104孢子悬浮液，得葡枝根霉(Rhizopus stolonifer)孢子悬浮液，备用；(2)摇瓶培养基配制：按各组份所占质量百分比：全脂豆粉2.0％，菜籽油0.3～0.6％，磷酸氢二钾1.2％，硫酸铵0.3％，硫酸镁0.3％，磷酸二氢钠0.4％，水95.2～95.5％，选取全脂豆粉、菜籽油、磷酸氢二钾、硫酸铵、硫酸镁、磷酸二氢钠和水混合，得摇瓶培养基，备用；(3)将聚氨酯剪切成3～5mm泡沫颗粒，备用；(4)按100ml摇瓶培养基中加1～3ml葡枝根霉(Rhizopus stolonifer)孢子悬浮液，100ml摇瓶培养基中加聚氨酯泡沫颗粒0.3～0.5g，将葡枝根霉(Rhizopus stolonifer)和聚氨酯在摇瓶培养基中，26～30℃条件下培养40～60h；取出长满葡枝根霉(Rhizopus stolonifer)的聚氨酯泡沫颗粒，真空干燥，得固定化全细胞酶，备用；2)酯化：将油酸、月见草油或食用大豆油中加入甾醇和固定化全细胞酶，置于水浴恒温振荡器中在温度40～60℃、转速100～300r/min的条件下进行酯化反应，反应时间46～50h，得酯化后的反应产物；其中，油酸、月见草油或食用大豆油与甾醇的质量比为3～7∶1；固定化全细胞酶为下述：(1)油酸、月见草油或食用大豆油，(2)甾醇，二种质量之和的1.0～1.7％；3)离心分离、干燥：将酯化后的反应产物离心分离，离心后的上层液为植物甾醇酯产品；离心后的固体物冷冻干燥，得固定化全细胞酶催化剂。