一步法病原体核酸荧光定量PCR检测方法

摘要

一步法病原体核酸荧光定量PCR检测方法，该方法是：针对待测病原体核酸选取保守基因序列，设计特异性引物探针，采用一种核酸快速释放试剂提取病原体核酸，直接加入相应的PCR反应液，实现PCR荧光定量检测。本发明操作简单快速，抗污染抗干扰能力强，提取的核酸无损失，快速准确，所用试剂制造成本低。

主权项

一种一步法病原体核酸荧光定量PCR检测方法，包括针对待测病原体核酸选取保守基因序列，设计特异性引物探针步骤，其特征在于，采用一种核酸快速释放试剂提取病原体核酸，直接加入相应的PCR反应液，实现PCR荧光定量检测；所述核酸快速释放试剂由0.01～0.5mM/L(与KCl水溶液的质量体积比)的表面活性肽溶解于50～200mM/L的KCl水溶液，0.01％～2％(与无菌水的质量体积比)的SDS、LLS或Chelex-100，以及0.05％～1％(体积)的乙醇组成。所述百分比以无菌水体积为计算基准。