摘要 |
Método que utiliza un ensayo de complementación proteínica/sistema indicador universal (PAC/URS) para la detección y la localización de un ligando de un receptor celular, incluyendo dicho método: (a) la generación de un primer vector de ácido nucleico que codifique un primer producto de fusión, que comprende: (i) un primer fragmento de una primera molécula indicadora PCA/URS, y (ii) una segunda molécula, fusionada con dicho primer fragmento, que comprende un primer subdominio del receptor de eritropoietina; (b) la generación de un segundo vector de ácido nucleico que codifique un segundo producto de fusión, que comprende: (i) un segundo fragmento de dicha primera molécula indicadora PCA/URS, y (ii) una tercera molécula, fusionada con dicho segundo fragmento, que comprende un segundo subdominio de dicho receptor de eritropoietina, y en la que dicho segundo subdominio puede ser el mismo que dicho primer subdominio, o diferente de dicho primer subdominio; (c) la transfección de células procarióticas o eucarióticas con dicho primer y segundo vectores de ácido nucleico; y (d) verificación en dichas células transfectadas de la actividad indicadora del PCA/URS, indicando dicha actividad la reasociación del primer y del segundo fragmento de la molécula PCA/URS mediada por la interacción de dichos primer y segundo subdominios del receptor de eritropoietina, estando inducida dicha asociación mediante el enlace de dicho receptor con dicho ligando, en el que dicha molécula indicadora PCA/URS es un polipéptido codificado por un gen que se ha diseccionado racionalmente en al menos dos fragmentos que codifican, respectivamente, dicho primer fragmento y dicho segundo fragmento de dicha molécula indicadora PCA/URS.
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