一种基于VPA诱导的人骨髓间充质干细胞体外分化肝细胞的方法

摘要

本发明公开了一种新的基于VPA诱导的人骨髓间充质干细胞体外分化肝细胞的方法，是以人的骨髓为原料，分离其间充质干细胞，在组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸VPA处理后，依次加入成纤维细胞生长因子4、肝细胞生长因子、抑瘤素和地塞米松，诱导其向肝细胞分化，得到一类具有合成糖元、尿素和分泌白蛋白等肝细胞生物学功能，且具有双核、多边形的肝细胞样细胞。本发明的方法大幅度提高了人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的效率，不仅为人骨髓间充质干细胞开发应用于肝脏疾病的细胞移植治疗以及开展肝组织工程等提供了新技术和开辟了新的途径，而且也为肝细胞分化发育分子机制包括表观遗传机制等的研究提供了新的研究模型。

主权项

一种基于VPA诱导的人骨髓间充质干细胞体外分化肝细胞的方法，其特征在于该方法是以人的骨髓为原料，通过分离其间充质干细胞，在组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸处理后，依次加入成纤维细胞生长因子4、肝细胞生长因子、抑瘤素和地塞米松，诱导其向肝细胞分化；包括如下步骤：(1)骨髓间充质干细胞的分离与制备；(2)进行丙戊酸预处理后，不同细胞因子组合方式诱导培养细胞向成骨、脂肪和软骨方向的诱导分化；(3)分化肝细胞的鉴定。