鸡胚卵黄囊膜血管生成模型与分析方法及其用途

摘要

本发明为一种鸡胚卵黄囊膜血管生成模型，本模型是用于检测或筛选对新生血管生成具有影响作用药物的活体实验模型。本发明的主要步骤是：将孵化60小时的鸡胚离壳后移入小烧杯中，继续孵育12小时，将待测药物加入到放置在卵黄囊膜上的硅胶环内，在对照液和待测药液中都含有甘油或二甲基亚砜作为渗透剂，12小时后取下硅胶环，开始动态观察药物对卵黄囊膜血管生成的影响作用。根据卵黄囊膜血管在影响血管生成药物作用下表现出相应的生长状态，判断出检测药物对血管生成具有抑制还是刺激作用或无作用，使本发明与传统的鸡胚尿囊膜血管生成试验模型相比，具有简单、直观、快速、准确等优点。

主权项

一种建立鸡胚卵黄囊膜血管生成模型的方法，包括以下步骤：1)将鸡卵置于正常孵化温度下、有加湿水盘的孵箱中孵化50-70小时，再将鸡卵内容物倾倒入有盖的无菌小玻璃烧杯中，继续孵化8-16小时；2)挑选卵黄膜完整、血管网及胚盘发育良好的鸡胚，鸡胚随机分成对照组和测试组，将外径26毫米，内径22毫米的硅胶环放置于鸡胚的卵黄囊血管网上；3)对照组：在硅胶环中加入促渗透剂150-220微升，所述的渗透剂为含有5-10％甘油或含有0.4-0.8％二甲基亚砜的PBS溶液；测试组：硅胶环中加入含待测药物的上述对照溶液150-220微升，继续孵育8-16小时后撤走硅胶环，对给药前后卵黄囊血管面积、密度或卵黄囊膜面积变化进行测定，测试组中卵黄囊膜血管面积、密度或卵黄囊膜面积增长率明显大于对照组的确定为血管生成刺激药物，明显低于对照组的确定为血管生成抑制药物。