NUEVO METODO DE CLONACION DE DNA BASADO EN EL SISTEMA DE RECOMBINACION RECE-RECT DE E. COLI.

摘要

Un método para la clonación de moléculas de DNA en células, que comprende los pasos de (a) proporcionar una célula huésped aislada capaz de realizar la recombinación homóloga mediante un mecanismo dependiente de recET, (b) poner en contacto en la mencionada célula huésped una primera molécula de DNA circular, capaz de ser replicada en la mencionada célula huésped, con una segunda molécula de DNA que comprende al menos dos regiones de homología de secuencia para regiones de la primera molécula de DNA, en condiciones que favorecen la recombinación homóloga entre las mencionadas moléculas primera y segunda de DNA mediante un mecanismo dependiente de recET y (c) seleccionar una célula huésped aislada en la que ha ocurrido la recombinación homóloga entre las mencionadas moléculas primera y segunda de DNA, en el cual una segunda molécula de DNA se introduce en la célula huésped de una forma que permite la recombinación sin modificación ulterior, con la condición de que la célula huésped no sea una célula madre embrionaria humana o una célula de una línea germinal humana.