一种检测小麦基因组中的DNA差异的方法

摘要

本发明涉及一种检测小麦基因组中的DNA差异的方法，属于生物技术领域。对小麦的基因组DNA进行PCR扩增，在扩增产物中添加1.5-3倍的变性上样液，98℃变性10-15分钟；变性产物放置于0-4℃的低温下5-10分钟；变性产物在12％的非变性聚丙烯酰胺凝胶中，20-25℃，电泳2h。本发明的优点在于：应用与SSR分析相同的实验设备和条件，可进行SSCP分析，不需经测序或标记转化，且不依赖于特殊仪器设备，即可用于小麦的突变或微小变异研究及分子标记辅助育种和品种鉴定。

主权项

一种检测小麦基因组中的DNA差异的方法，包括：提取小麦的DNA，对小麦的基因组DNA进行PCR扩增，在扩增产物中添加1.5-3倍的变性上样液，变性上样液组成为：体积比为98％的去离子甲酰胺，10mmol/L PH＝8.0的EDTA，质量比为0.025％的二甲苯氰FF，和质量比为0.025％的溴酚蓝；然后在98℃的温度下变性10-15分钟；变性结束后将变性产物置于冰上，放置于0-4℃的低温下5-10分钟；将上述变性后的产物在质量比为12％的非变性聚丙烯酰胺凝胶中，12％非变性聚丙烯酰胺凝胶组成为：100ml聚丙烯酰胺胶溶液中含有11.6克丙烯酰胺和0.4克甲叉双丙烯酰胺；20-25℃的条件下，电泳缓冲液为0.5×TBE，常温下恒功率80W电泳2h，银染，观察照相和相应的数据分析。