从微生物发酵液中分离提取透明质酸的方法

摘要

本发明提供了一种从微生物发酵液中分离提取透明质酸的方法，包括如下步骤：(1)对含有透明质酸的发酵液，通过氯代十六烷基吡啶进行络合或通过乙醇进行醇沉；(2)收集络合物或醇沉物，加入氯化钠水溶液，络合物或醇沉物的解离或溶解；(3)收集解离物或溶解物中的透明质酸沉淀，用水溶解，干燥，获得目标产物。采用简单的设备和简单的四步操作有序组合，就制得医用级HA，且HA得率约90％，分子量损失率约15％，避免复杂的设备不利于放大或增加生产成本，无须烦琐的步骤使HA得率降低，分子量损失率变大或大量使用有机溶剂增大成本，从而利于工业化放大生产透明质酸。

主权项

从微生物发酵液中分离提取透明质酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将含有透明质酸的发酵液加水稀释至透明质酸的含量为0.3～0.5g/ml，然后加入氯代十六烷基吡啶；搅拌，络合；(2)将步骤(1)的产物离心分离，收集固体络合物；(3)加入浓度为0.4～1M的氯化钠水溶液至原发酵液体积的0.9～1.1倍，络合物解离，获得透明质酸溶液；(4)加入乙醇，加量为：透明质酸溶液∶乙醇＝1∶2，体积比，搅拌，沉淀，得到纤维状透明质酸沉淀物；(5)加入0.1～0.2M氯化钠至1.8～2.2倍的发酵液体积，搅拌至沉淀溶解；(6)在溶解液中加入珍珠岩和活性炭，搅拌，过滤，得到滤液；(7)向滤液中加入乙醇，加量为透明质酸溶液∶乙醇＝1∶1.5～2.5，体积比，搅拌后得到透明质酸沉淀；(8)用水溶解沉淀，喷雾或真空干燥得医用级透明质酸干粉，透明质酸的分子量为1～3MD。