以聚合酶链锁反应监别梅及李之加工品

摘要

本发明利用分子标志技术建立快速精确之梅与李分子监别技术；针对其核糖体核酸基因之内转录第一间隔区(简称ITS1)为目标片段进行试验，建立梅及李之完整目标核酸序列，并针对ITS1序列之差异性设计引子，以复式聚合酶链锁反应(multiplex PCR)及即时定量聚合酶连锁反应侦测系统(LightCycler System)，针对梅与李作监别分析。

主权项

一种可分辨梅及李加工品的检测法，其主要以引子(primer)对梅及李的rDNA(ribosome DNA)及ITS(internal transcribed spacer)区域进行聚合酶链锁反应(polymerase chain reaction)，并分析其增幅放大之片段，进行反应使用之试剂中包括梅或李的DNA、dNTP、DNA聚合酶(DNA polymerase)、缓冲液(buffer)、水及引子(primer)，其引子对系选自于下列引子对(i)正向引子dITS1，其具有如SEQ ID NO1所示之序列，正向引子ITS1，其具有如SEQ ID NO2所示之序列，与反向引子ITS2，其具有如SEQ ID NO3所示之序列；(ii)正向引子sITS1，其具有如SEQ ID NO4所示之序列，与反向引子sITS2，其具有如SEQ ID NO5所示之序列；其分析增幅放大片段之方法，于使用引子对(i)时系分析其增幅放大之片段数目，于使用引子对(ii)时系分析其增幅放大片段之熔解温度(melting temperature)。