利用组培技术筛选克服作物连作障碍有益细菌的方法

摘要

本发明公开了一种利用组培技术筛选克服作物连作障碍有益细菌的方法，步骤如下：先建立目标作物的组织培养体系，并分离细菌菌株、制备作物提取物，然后向目标作物的组织培养体系中接种细菌菌株，并添加作物提取物，观察其对培养物的影响情况，然后进行综合分析，确定有益细菌菌株，然后采用常规细菌发酵技术生产有益菌制剂，用于大田预防和治理作物的连作障碍。本发明利用了组织培养技术，避免了各种环境因素的影响，不受气候和季节的限制，筛选有益细菌的速度得到了显著的提高；本发明以土壤菌株对目标作物残体胁迫的缓解能力以及对酚酸类成分的降解能力作为评价指标，所确定有益菌的针对性显著增强。

主权项

一种利用组培技术筛选克服作物连作障碍有益细菌的方法，其特征在于，步骤如下：1)建立目标作物的组织培养体系，得到无性繁殖的试管苗；2)从目标作物适宜种植的土壤中或目标作物体表分离得到不同的细菌菌株；3)制备作物提取物：所述作物提取物是指目标作物整体或任何部位的任何溶剂所提取的溶液或其干燥物；4)在目标作物的组织培养体系中接种步骤2)中得到的不同细菌菌株，观察、评价各菌株对试管苗生长发育的影响；5)在目标作物的组织培养体系中添加作物提取物，培养一段时间后，接种步骤2)中得到的不同细菌菌株，观察、评价试管苗生长发育情况；6)在目标作物的组织培养体系的培养基中添加根际土壤常见有机酸，并接种步骤2)中得到的不同细菌菌株，定期测定培养基中有机酸的含量；7)综合分析，满足以下三个条件之一的菌株即可认为是有益细菌菌株：a步骤4)中能促进试管苗生长的菌株；b步骤5)中能促进试管苗生长的菌株；或因添加作物提取物而使试管苗难以生长，接种后能使试管苗恢复生长的菌株；c步骤6)中能使有机酸含量显著下降的菌株；确定有益细菌菌株后，采用常规细菌发酵技术生产有益菌制剂，用于大田预防和治理作物的连作障碍；以上步骤并无严格顺序限制，可自由调整，上述1)～7)仅为方便描述，并非顺序上的限制。