高活性重组脂酶的制备方法

摘要

本发明公开了高活性重组脂酶的制备方法。该方法包括：(a)将脂肪酶包涵体与3-10M尿素水溶液混合，从而溶解包涵体，获得含变性脂肪酶的变性溶液；(b)对步骤(a)的变性溶液在低离子强度的复性液中进行稀释复性，从而获得含活性脂肪酶的复性溶液；(c)对步骤(b)的复性溶液进行分离纯化，从而获得比活性大于或等于10000U/g的脂肪酶，或者对步骤(b)的复性溶液进行浓缩，从而获得含比活性大于或等于10000U/g的脂肪酶的浓缩溶液。本发明方法可高效地得高活性、高纯度的重组脂酶。

主权项

1、一种脂肪酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)将脂肪酶包涵体与3-10M尿素水溶液混合，从而溶解包涵体，获得含变性脂肪酶的变性溶液；(b)对步骤(a)的变性溶液在低离子强度和pH 5.5-8.5的条件下进行稀释复性，从而获得含复性脂肪酶的复性溶液，其中所述的低离子强度是指溶液的离子强度小于或等于1.5mmol/L PBS水溶液的离子强度；(c)对步骤(b)的复性溶液进行分离纯化，从而获得比活性大于或等于10000U/g的脂肪酶，或者对步骤(b)的复性溶液进行浓缩，从而获得含比活性大于或等于10000U/g的脂肪酶的浓缩溶液。