改良的诺如病毒RNA检测方法

摘要

一种RNA扩增工序，其包括以下工序：使用下述引物对中的至少两组，通过逆转录酶，生成包含启动子序列的双链DNA，所述引物对为：由对于与诺如病毒的各个基因型的RNA相同或者互补的核酸序列杂交效率高的第一引物和第二引物(该引物中的任意一者的5’末端附加有启动子序列)组成的引物对；以该双链DNA作为模板，通过RNA聚合酶生成RNA转录产物；该RNA转录产物继续作为利用所述逆转录酶合成DNA的模板，生成所述双链DNA。在所述RNA扩增工序中，通过用嵌入剂性荧光染料标记的核酸探针测定被扩增的RNA转录产物量。

主权项

1.一种诺如病毒RNA的检测方法，其特征在于，其为检测试样中的诺如病毒RNA的方法，包括以下工序：(1)以诺如病毒RNA内的特定核酸序列为模板，通过第一引物和第二引物、RNA依赖性DNA聚合酶、核糖核酸酶H(RNase H)、及DNA依赖性DNA聚合酶，生成包含启动子序列和在该启动子序列下游的所述特定碱基序列的双链DNA的工序，其中，在所述第一引物和所述第二引物的任意一者的5’末端附加有启动子序列；(2)以该双链DNA作为模板，通过RNA聚合酶，生成包含所述特定碱基序列的RNA转录产物的工序；(3)该RNA转录产物继续作为所述双链DNA合成的模板，从而将该RNA转录产物链式扩增的工序；(4)测定所述RNA转录产物量的工序；所述第一引物由选自下述寡核苷酸中的至少二种寡核苷酸的混合物组成：序列与序列号1～4中记载的序列中的至少任意一者分别充分相同的寡核苷酸；所述第二引物由选自下述寡核苷酸中的至少二种寡核苷酸的混合物组成：序列与序列号5～9中记载的序列中的至少任意一者分别充分互补的寡核苷酸。