核酸分子的生成

摘要

本发明在广义上涉及在增强型固相多核苷酸扩增后生成单链核酸分子的方法。本发明应用使用这样的引物的扩增反应，即在特定退火条件下具有不同引发特性的引物或者嵌套于两个水相引物之间的固定引物。因此，通过引物设计，与水相引物相比提高了固相载体引物的参与。本发明还提供了以单链及双链核酸分子标记固体基质的方法。用于生成单链核酸分子及用于进行扩增反应的试剂盒也形成本发明的一部分。本发明还提供了用于生成任选地以报告分子标记的单链核酸分子的扩增体系，以及它们尤其作为标签、引物和探针的用途。

主权项

1.一种用于在反应器中生成单链多核苷酸的方法，所述方法包括通过以下方式将双链的靶多核苷酸或其单链的衍生物进行指数扩增：在实现固定引物延伸的反应条件下，将其上具有以连接子方式结合的引物的固体基质与包含至少一种核酸分子的样品接触，其中所述固定引物选自：(i)与水相引物有序列同一性但具有不同于固定引物的熔解温度的引物；和(ii)嵌套于两个水相引物之间的引物；以有利于生成固定于所述固体基质上的双链多核苷酸，然后使所述固定的多核苷酸处于变性条件以生成一条固定的单链多核苷酸及一条液相的单链多核苷酸。