猪血管脱细胞的支架的化学与物理结合的制备方法

摘要

本发明的猪血管脱细胞的支架的化学与物理结合的制备方法，主要包括备料、浅表细胞破膜、浅表细胞脱除、深层细胞脱除等步骤，使用表面活性剂只需在完成浅表细胞脱除任务的同时将深层细胞破膜即可，所以只需在适当浓度的表面活性剂溶液中孵育振荡约1小时即可，对深层细胞脱除任务可以用较低的功率的超声波在较短的时间内即可完成，相互配合可使制备猪血管脱细胞的支架具有使用设备费用较低、制备时间较短、细胞脱除彻底、易于洗净表面活性剂、细胞外基质(支架)保存完好和良好的生物相容性、适度的生物降解速率、机械强度高、易于缝合固定等优点，该支架还有利于人体细胞的定植和生长，并能随着真的血管的再生而被逐渐降解和吸收。

主权项

1、一种猪血管脱细胞的支架的化学与物理结合的制备方法，其特征在于包括以下步骤：A)备料：取健康猪的升主动脉和主动脉弓及不短于5mm冠状动脉，用PBS缓冲液清洗后放入二氧化碳干冰培养箱内消毒即为猪血管，备用；B)浅表细胞破膜：将猪血管置于Tris低渗透缓冲液中孵育振荡24小时，取出后用PBS缓冲液振荡清洗数次，再置于Tris高渗透缓冲液中孵育振荡24小时，即可将猪血管的浅表细胞膜振破，取出后用PBS缓冲液振荡清洗数次；C)浅表细胞脱除：将浅表细胞破膜后的猪血管置于适当浓度的表面活性剂溶液中孵育振荡约1小时，可使浅表细胞脱除并可使深层细胞破膜，取出用PBS缓冲液振荡清洗数次；D)深层细胞脱除：将深层细胞已被破膜的猪血管再置于超声波破碎仪的装有双蒸水的容器中，将仪器设置在频率为20kHz，功率为135±35KW，工作5～15分钟，即可脱除猪血管的深层细胞，即为猪血管脱细胞的支架。