胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物载药胶束的制备方法和应用

摘要

本发明涉及胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物载药胶束的制备方法和应用，有效解决胆固醇修饰壳聚糖共聚物载药胶束的制备问题。其解决的技术方案是：1.纯化壳聚糖；2.制备胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物；3.胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物的分离纯化；4.制备胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物载药胶束。本发明具有在水性介质自组装形成一种热力学稳定的胶体溶液的特性，制备简单，效果好，是医学领域内的创新。

主权项

1、一种胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物载药胶束的制备方法，其特征在于，所说的胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物，其结构式如下：其中m、n为聚合度，m+n≤20，壳聚糖的分子量为3～50kDa，脱乙酰度为70～100％，其制备方法由以下步骤实现：(1)、壳聚糖的纯化：取分子量3～50kDa的壳聚糖粗品，加入壳聚糖重量的65～85倍的0.1M的冰醋酸溶液，搅拌溶解，过滤，滤液中加入0.2M的氢氧化钠溶液，中和冰醋酸，使壳聚糖完全沉淀，过滤，用去离子水洗涤滤饼至PH值在67，冷冻干燥，得到纯化的壳聚糖；(2)、胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物的制备：利用胆固醇甲酰氯中具有强反应活性的酰氯基团与壳聚糖主链上脱乙酰化的氨基之间的酰胺反应，合成胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物，步骤是：称取纯化的壳聚糖和胆固醇甲酰氯，壳聚糖分散在体积比为：1～3∶3～1的二甲基亚砜和氯仿溶液中，溶液中壳聚糖的浓度为5～15mg/ml，加入三乙胺1～2ml进行催化并磁力搅拌，得混合溶液，备用；再将胆固醇甲酰氯溶于氯仿溶液中，胆固醇甲酰氯的浓度是50～100mg/ml，将此溶液缓慢滴加到上述催化并磁力搅拌下的混合溶液中，反应36～54小时，壳聚糖和胆固醇甲酰氯的反应的摩尔比例是1～4∶4～1，即得胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物；(3)、胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物的分离纯化：将胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物过滤，滤液装入透析袋中于去离子水中透析5～7天后，透析袋截留分子量为8000～14000，得到固体物，干燥，于硅胶柱分离，洗脱剂为二氯甲烷或石油醚和乙酸乙酯的混合液，其中石油醚和乙酸乙酯按体积比为4～6∶1混合，收集产物的洗脱液，挥发除去二氯甲烷或石油醚和乙酸乙酯，干燥，得到胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物的固体粉末；(4)、胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物载药胶束的制备：将药物与胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物的固体粉末按重量比为1∶1～10的比例溶于无水乙醇中，使药物与胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物的固体粉末完全溶解，得溶解液，药物在无水乙醇中的浓度为0.5～1mg/ml，胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物在无水乙醇中浓度为0.5～10mg/ml，另取去离子水，磁力搅拌，将上述加入无水乙醇的溶解液缓慢滴加到此去离子水中，无水乙醇与去离子水的体积比为1∶2～5，滴加完后，再继续搅拌20～120min，然后在20℃～70℃，0.4～1kpa减压，用旋转蒸发仪旋转蒸发，蒸发至搅拌后溶液体积的1/5～1/3，得到的溶液装入透析袋以去离子水为透析介质透析50～100min，透析袋截留分子量8000～14000，即得到胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物载药胶束，胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物载药胶束的载药量为2％～15％。