一种从组分Ⅰ+Ⅲ或组分Ⅲ中提取人免疫球蛋白的方法

摘要

本发明涉及从组分I+III或组分III中提取人免疫球蛋白的方法，可有效解决从组分I+III或组分III中提取人免疫球蛋白，以满足人们对免疫球蛋白的需求问题，是由以下步骤实现：①组分I+III或组分III沉淀的溶解；②去除组分I；③分离组分III；④分离组分II；⑤组分II沉淀溶解过滤；⑥超滤、透析、浓缩；⑦组分II加温提纯；⑧纯化；⑨超滤透析，本发明方法先进，工艺简单，可以有效的从组分I+III或组分III中分离出组分II进而制成人免疫球蛋白成品，对缓解国内原料血浆供应紧张的局面具有十分重要的现实意义，既充分实现了对原料的充分利用，又防止了对环境的污染，经济和社会效益巨大。

主权项

1、一种从组分I+III或组分III中提取人免疫球蛋白的方法，其特征在于，由以下步骤实现：①组分I+III或组分III沉淀的溶解；②去除组分I：调整溶解液pH至4.8～5.1，降温，加入乙醇至乙醇浓度为8～9％，复测并校正pH至4.8～5.1，搅拌反应降温至-2.0℃～2.5℃，之后，每千升反应液中加入硅藻土4kg和珍珠岩4kg，搅拌反应，之后，压滤分离组分I，收集上清液弃去沉淀；③组分III的分离：计量上清液体积，调整上清液pH5.05～5.25，加入乙醇至乙醇浓度为13～15％，调整加乙醇后的溶液pH5.05～5.25，控制温度-2.0℃～-4.0℃，搅拌反应2小时以上，之后，每千升反应液中加入硅藻土3kg和珍珠岩3kg，搅拌后，压滤分离组分III，收集上清液，弃去沉淀；④组分II的分离：计量上清液体积，加入氯化钠至浓度4.5～5.5g/L，调pH6.8～7.2，加入95％乙醇至乙醇浓度为17～19％，降温至-5.0～-6.0℃，搅拌反应2小时以上，压滤分离组分II，收集压滤机上的沉淀；⑤组分II沉淀溶解过滤：组分II沉淀用5～10倍沉淀重量2～8℃注射用水溶解，校正pH值至4.9～5.2，溶解后板框过滤；⑥超滤、透析、浓缩：过滤液用截流分子量为50KD超滤器进行浓缩、透析，后浓缩至蛋白浓度60～80g/L，调整pH至4.80～5.10，添加山梨醇，山梨醇添加量为40～60g/L，用注射用水调整的蛋白浓度在40～60g/L；⑦组分II加温提纯：将步骤⑥中的溶液温度升至51～53℃恒温3小时，恒温结束后降至室温；⑧纯化：用0.01M的磷酸氢二钠缓冲液稀释溶液，校正溶液pH5.10～5.20，降温至0～1℃，加入95％乙醇至乙醇浓度14％～15％，加入NaCl使其含量为1.5～1.8g/L，继续降温至-4.0℃～-5.0℃，静置上清液抽至反应罐中，压滤，收集压滤液；⑨超滤透析：将压滤液用7～8倍2～8℃注射用水连续透析，浓缩至蛋白浓度60～80g/L，再进行病毒灭活步骤后，即可进行除菌分装。