利用纳米金颗粒和电洗脱实现单碱基错配识别的方法

摘要

一种利用纳米金颗粒和电洗脱实现单碱基错配识别的方法，包括以下步骤：固定DNA探针，加入目标DNA，反复冲洗，检测目标DNA杂交后的SPR响应信号；加入巯基DNA修饰的纳米金颗粒杂交，反复冲洗，检测巯基DNA杂交后的SPR响应信号；金属薄膜表面荷负电进行电洗脱，检测电洗脱后的响应信号；若电洗脱后的SPR响应信号小于巯基DNA杂交后的SPR响应信号，则可知加入的目标DNA是单碱基错配的DNA。本发明方法既可除去单碱基错配目标DNA所造成的干扰，又可确保cDNA杂交引起的信号变化在电洗脱中不受影响；采用的DNA探针设计简单、传感芯片可重复利用。

主权项

1、一种利用纳米金颗粒和电洗脱实现非诊断目的的单碱基错配识别的方法，其特征在于包括以下步骤：a.在表面等离子体共振传感器金属薄膜表面上固定DNA探针，制成传感芯片，然后加入目标DNA进行杂交，中性缓冲溶液反复冲洗金属薄膜，利用表面等离子体共振传感器获得目标DNA杂交后的表面等离子体共振响应信号；b.上述最终所得体系中加入巯基DNA修饰的纳米金颗粒，杂交完成后，中性缓冲溶液反复冲洗金属薄膜，利用表面等离子体共振传感器获得巯基DNA杂交后的表面等离子体共振响应信号；c.调节金属薄膜与导电玻璃之间的电位差至-5～-20V，使金属薄膜表面荷负电，然后用中性缓冲溶液反复冲洗金属薄膜进行电洗脱，利用表面等离子体共振传感器获得电洗脱后的表面等离子体共振响应信号；d.比较目标DNA杂交后的表面等离子体共振响应信号、巯基DNA杂交后的表面等离子体共振响应信号和电洗脱后的表面等离子体共振响应信号，若电洗脱后的表面等离子体共振响应信号小于巯基DNA杂交后的表面等离子体共振响应信号，则可知加入的目标DNA是单碱基错配的DNA。