重组人白细胞介素12真核表达载体的构建及其应用

摘要

重组人白细胞介素12真核表达载体的构建及其应用，它涉及重组人白细胞介素12(rhIL-12)表达载体的研制、稳定表达细胞系的筛选、其核酸疫苗基因佐剂功能和肿瘤基因治疗作用。采用10个疏水的柔性氨基酸接头连接P40、P35获得融合基因构建rhIL-12真核表达质粒(pCDNA6-IL-12)。将其转染CHO细胞筛选出了稳定表达细胞系，并且表达产物具有良好的生物学活性。pCDNA6-IL-12与核酸疫苗共免疫可显著增强其免疫效果。直接在实验小鼠肿瘤模型瘤体内注射或用其对肿瘤细胞进行基因修饰后再植入均可发挥强大的抗肿瘤作用。经进一步完善后可进入临床试用阶段的研究。

主权项

1、重组人白细胞介素12真核表达载体的构建及其应用，其特征在于pCDNA6-IL-12的构建过程：采用10个疏水的柔性氨基酸接头连接的方案获取rIL-12 P40、P35融合基因，插入真核表达质粒(pcDNA6/v5-hisp)，构建重组rIL-12表达载体(pCDNA6-IL-12)；通过酶切、测序鉴定重组克隆。