用于在肿瘤细胞中有效给予和表达治疗性基因的腺病毒/α病毒杂交载体

摘要

本发明涉及杂交的腺病毒基因表达载体，其特征在于沿着5’至3’方向其至少包括下列元件，即：i.腺病毒来源的第一链，其含有第一反向末端重复序列(ITR)和用于包装腺病毒的信号序列；ii.第一非编码填充片段序列；iii.对应于组织特异性启动子的序列；iv.衍生自α病毒的cDNA链，其序列部分地互补于α病毒RNA，至少包括编码至少一种目的外源基因的序列；v.多聚腺苷酸化序列；以及vi.第二腺病毒反向末端重复序列(ITR)。本发明优选涉及包括哺乳动物白介素治疗性基因IL-12、更优选人白介素hIL-12作为目的外源基因的腺病毒杂交载体。本发明还涉及所述杂交载体在将遗传物质转入细胞的方法中的用途，特别是肿瘤细胞，优选表达α-甲胎蛋白(AFP)的细胞；本发明还涉及所述杂交载体在诱导针对外源基因的免疫应答中的用途。

主权项

1.基因表达腺病毒杂交载体，沿5’至3’方向其至少包括下列元件：i.腺病毒来源的第一链，其包括第一反向末端重复(ITR)序列和用于包装所述腺病毒的信号序列；ii.第一非编码填充片段序列；iii.对应于组织特异性启动子的序列；iv.衍生自α病毒的cDNA链，其序列部分地互补于α病毒RNA序列，至少包括编码至少一种目的外源基因的序列，其还包括：a)所述α病毒复制所需的5’序列，b)编码所述α病毒RNA的复制所需的非结构蛋白的序列，c)所述α病毒的至少一种亚基因组启动子，以及d)所述α病毒复制所需的3’序列；v.多聚腺苷酸化序列；以及vi.第二腺病毒反向末端重复(ITR)序列。