一种石榴细胞培养法制备黄酮类化合物的方法

摘要

一种石榴细胞培养法制备黄酮类化合物的方法，首先以石榴种子制备无菌苗，以无菌苗为外植体接种在固体接着基(I)上于25±1℃培养愈伤组织将愈伤组织接种在液体培养基(II)中进行种子培养和生产培养，经分离提纯得到总黄酮。所述的培养基(I)是在MS培养基中添加0.5～2.0mg/L 2，-4D和0.0～0.5mg/L KT，pH5.5～5.7；所述的培养基(II)是未加琼脂的MS培养基，pH5.4～5.6。培养物中总黄酮含量达8.31％，远高于石榴中的含量。

主权项

1、一种石榴细胞培养法制备黄酮类化合物的方法，以石榴种子为起始原料，包括石榴无菌苗的制备、愈伤组织培养和细胞悬浮培养以及总黄酮的分离和提取，其特征在于：所述的愈伤组织培养是由石榴种子培养获得的石榴无菌苗作为外植体接种在固体培养基(I)上于25±1℃培养20～30天，并继代培养至少五代，每代20～22天，所述的固体培养基(I)是在MS培养基中添加0.5～2.0mg/L 2，-4D和0.0～0.5mg/L KT，pH5.5～5.7；所述的细胞悬浮培养是愈伤组织接种在液体培养基(II)中于25±1℃、无光照条件下培养12～18天得到种子，然后将种子接种在液体培养基(II)中于25±1℃、暗培养21～24天；所述的液体培养基(II)是未加琼脂的MS培养基pH5.4～5.6。