一种生产5’-呈味核苷酸的方法

摘要

本发明属于生化工程技术领域，具体涉及一种以DNA重组技术构建基因工程菌，对该基因工程菌进行突变筛选，并利用高活性基因工程菌生产5’-核苷酸的方法。包括如下步骤：1.利用重组DNA技术，构建酸性磷酸酶表达载体，并转化大肠杆菌，得到高效表达酸性磷酸酶的基因工程菌。2.酸性磷酸酶基因的突变与对核苷具有较高亲和性的酸性磷酸酶的筛选。3.以酸性磷酸酶催化核苷与磷酸基团供体合成5’-核苷酸。利用本发明的方法催化合成5’-核苷酸，具有简单，高效，周期短，低成本，符合环保要求等特点，适合于工业化生产。

主权项

1.一种生产5’-呈味核苷酸的方法，其特征在于包括如下步骤：1.1利用重组DNA技术，构建酸性磷酸酶表达载体，并转化大肠杆菌，得到高效表达酸性磷酸酶的基因工程菌；所述的酸性磷酸酶来源于产气肠杆菌，其核苷酸序列为SEQ.ID.NO.1，氨基酸序列为SEQ.ID.NO.2；1.2酸性磷酸酶基因的突变与筛选对核苷具有较高亲和性的酸性磷酸酶；该突变型酸性磷酸酶的核苷酸序列为SEQ.ID.NO.3，氨基酸序列为SEQ.ID.NO.4；1.3以对核苷具有较高亲和性的酸性磷酸酶催化核苷与磷酸基团供体合成5’-呈味核苷酸；其中，所述的核苷为肌苷，所述的磷酸基团供体为焦磷酸盐。